人红细胞内血红蛋白与硫氧还蛋白过氧化物酶2的相互作用

发布时间：2017-08-13 21:30

  本文关键词：人红细胞内血红蛋白与硫氧还蛋白过氧化物酶2的相互作用

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【摘要】：目的研究人红细胞内硫氧还蛋白过氧化物酶2(Prx2)与血红蛋白(Hb)的相互作用。方法首先利用红细胞Hb再释放试验分离红细胞和溶血液电泳释放的4个区带,即Hb A、Hb A2、Hb A与Hb A2之间(Hb A-A2)及再释放Hb,将这些区带分别切下,通过反复冻融获得各区带所含蛋白;用葡聚糖G-25浓缩后再利用SDS-PAGE分离各区带所含蛋白组分,并用抗-Prx2做免疫印迹分析;最后用微量热泳动试验(MST)分别检测Prx2蛋白与Hb A和Hb A2之间的结合常数。结果红细胞电泳释放的区带Hb A、Hb A2、Hb A-A2及再释放Hb中均有Prx2;而溶血液电泳释放的Hb区带中,除Hb A2外其余各Hb区带中均有Prx2。MST检测显示,Prx2蛋白与Hb A的结合常数(Kd值)为(14±1.08)μmol/L,而与Hb A2之间的Kd值未被检测到。结论 Prx2与Hb A之间存在相互作用,但与Hb A2之间可能没有相互作用。
【作者单位】： 包头医学院生物化学与分子生物学教研室;包头医学院第三附属医院检验科;
【关键词】： 红细胞 血红蛋白 Hb A Hb A 硫氧还蛋白过氧化物酶 Hb再释放试验 SDS-PAGE 微量热泳动
【基金】：国家自然科学基金(81160214) 内蒙古自然科学基金(2010BS1101) 内蒙古自治区卫生厅基金(2010056) 内蒙古自治区研究生教育创新项目(S201310127(Y02)、S201410127(Y01))
【分类号】：R3411
【正文快照】： 红细胞血红蛋白释放试验(hemoglobin release test,HRT)是我们建立的利用淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳观察完整红细胞内血红蛋白(Hb)电泳释放的1种方法[1]。HRT可分为“初释放”(initial release):1次通电电泳后从红细胞释放出Hb;“再释放”(re-release):电泳过程中断电-再通电后

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本文编号：668983