降钙素对超高分子量聚乙烯颗粒诱导巨噬细胞分泌TNF-a、MMP-2、MMP-9的影响

发布时间：2017-08-19 03:08

  本文关键词：降钙素对超高分子量聚乙烯颗粒诱导巨噬细胞分泌TNF-a、MMP-2、MMP-9的影响

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【摘要】：目的：观察降钙素在体外对超高分子量聚乙烯(UHMWPE)颗粒诱导人单核白血病细胞源性巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,探讨降钙素是否具有抑制巨噬细胞分泌TNF-a、 NMP-2、MMP-9的作用,为降钙素防治人工关节无菌性松动提供理论支持 方法：随机选取无菌性松动患者翻修人工关节中的界膜组织,提取高分子聚乙烯颗粒；选取人单核白血病细胞株,加入PMA,诱导分化出巨噬细胞；使用最终浓度为108个/ml的UHMWPE颗粒悬液刺激巨噬细胞,模拟无菌性松动模型,同时以不同浓度的鲑鱼降钙素对巨噬细胞进行干预,将巨噬细胞分成5个实验组：A组为空白组,单纯巨噬细胞组,B组为空白对照组：UHMWPE颗粒+巨噬细胞；C组：UHMWPE颗粒+巨噬细胞+10-12mol/L浓度鲑鱼降钙素、D组：UHMWPE颗粒+巨噬细胞+10-10mol/L鲑鱼降钙素,E组：UHMWPE颗粒+巨噬细胞+10-8mol/L浓度鲑鱼降钙素素；用RPMI1640培养液配置(100U/ml青霉素、100u/ml链霉素,2mmol/l左旋谷氨酰胺)在5%CO2的饱和湿度、37℃的条件下培养48h,取上清液,应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测降钙素对巨噬细胞TNF-a、MMP-2与MMP-9蛋白表达的影响。 结果：与空白组相比,,空白对照组中TNF-a、MMP-2与MMP-9蛋白表达显著升高(P0.01),加入10-12mol/L浓度鲑鱼降钙素组的TNF-a、MMP-2与MMP-9蛋白表达稍下降,差异无统计学意义(P0.05)；而加入10-10mol/L.10-8mol/L浓度降钙素组的TNF-a、 MMP-2和MMP-9的蛋白表达与空白对照组相比,均有不同程度下降,10-10mol/L、10-8mol/L浓度降钙素组TNF-a、MMP-9蛋白下降的差异有统计学意义(P0.05),10-8mol/L浓度降钙素组MMP-2蛋白下降的差异具有统计学意义(P0.05)。 结论：1.UHMWPE颗粒刺激巨噬细胞的可以使TNF-a、MMP-2和MMP-9的表达提高。 2、降钙素能通过抑制巨噬细胞活性,抑制的TNF-a、MMP-2和MMP-9的蛋白表达,并且随着降钙素的浓度越大,抑制作用越大。
【关键词】：降钙素 基质金属蛋白酶 MMPs TNF-α
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 缩略词9-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 材料和方法12-17
• 2.1 细胞系来源12
• 2.2 实验用药物12
• 2.3 主要试剂12
• 2.4 主要仪器12-13
• 2.5 实验步骤13-16
• 2.6 实验数据的统计学处理16-17
• 第三章 结果17-28
• 3.1 所取的界膜标本17-18
• 3.2 倒置显微镜下观察细胞形态18-19
• 3.3 流式细胞仪检测巨噬细胞表面标记抗原19
• 3.4 细胞活力检测结果19-20
• 3.5 UHMWPE颗粒和不同浓度降钙素对巨噬细胞分泌的TNF-a、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响20-28
• 第四章 讨论28-32
• 第五章 结论32-33
• 综述33-42
• 参考文献42-48
• 攻读学位期间发表的学术论文48-49
• 致谢49

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 陈华江,王杰军;基质金属蛋白酶的结构及其调节机制[J];国外医学(肿瘤学分册);2001年01期

2 刘巍;Sally A.Huber;李淑清;;基质金属蛋白酶研究进展[J];哈尔滨医科大学学报;2011年05期

3 范卫民,马益民,王青;帕米磷酸钠和降钙素对人工关节磨损微粒引起单核细胞分泌溶骨性因子的影响[J];中华实验外科杂志;2003年07期

4 程涛;戴闽;郝亮;范红先;帅浪;姚浩群;程细高;;镁硅玉人工髋关节假体周围骨溶解与诱导型一氧化氮合酶、过氧亚硝基阴离子的关系[J];中国矫形外科杂志;2006年22期

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本文编号：698297