三维培养hESCs来源视杯样组织中c-kit和SSEA-4的时空表达特点研究

发布时间：2017-08-22 05:15

  本文关键词：三维培养hESCs来源视杯样组织中c-kit和SSEA-4的时空表达特点研究

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【摘要】：目的研究人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,h ESCs)三维培养后形成的视杯样组织中c-kit和SSEA-4表达的时空特性。方法 H1人胚胎干细胞行三维培养和神经诱导分化,在分化7、14、21、30、49、70、90 d固定组织并行免疫荧光鉴定检测c-kit和SSEA-4的表达,同时在相应时间点将分化组织消化成单细胞行流式细胞仪检测验证。结果三维培养第14天可见Rax+视泡(optic vesicle,OV)样结构,第30天形成具有内层Pax6+、外层Mitf+的双层视杯样(optic cup,OC)结构,第90天可见部分Crx+细胞。c-kit主要表达于h ESCs来源OV状及OC状的神经上皮样结构中,SSEA-4早期均匀表达于整个组织,晚期则主要集中于周边部。c-kit+细胞比例呈先升高(P0.01)后下降(P0.01)趋势,并在分化14 d达40%的峰值。SSEA-4+细胞比例从分化0 d至70 d持续下降(P0.01),直到90 d一直维持于该低水平。结论在三维培养h ESCs来源OV或OC状组织中,c-kit基因随诱导分化而激活,且主要表达于神经上皮层,呈先增高后下降趋势。SSEA-4早期高表达于整个组织,之后逐渐减少至周边部并维持于低水平状态。
【作者单位】： 解放军总医院眼科;第三军医大学西南医院全军眼科中心 视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室;
【关键词】： 三维培养 视杯 c-kit SSEA- 胚胎干细胞
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划,2013CB967002)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 重庆,第三军医大学西南医院全军眼科中心,视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室2)视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)、干性老年性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)、Stargardt’s病等视网膜变性类疾病常常累及多种视网膜细胞,如感光细胞、视网膜色素上皮

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本文编号：717248