Wnt信号途径促进脂肪间充质干细胞向Ⅱ型肺泡上皮细胞分化

发布时间：2017-08-25 06:01

  本文关键词：Wnt信号途径促进脂肪间充质干细胞向Ⅱ型肺泡上皮细胞分化

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【摘要】：背景:脂肪间充质干细胞向Ⅱ型肺泡上皮细胞定向分化的能力以及调节机制尚未完全阐明。目的:观察脂肪间充质干细胞在体外分化为Ⅱ型肺泡上皮的能力以及Wnt途径对分化的调节作用。方法:取大鼠脂肪组织,体外分离培养脂肪间充质干细胞并通过流式细胞术进行鉴定。实验分为对照组、小气道生长液组和Wnt3a组,对照组用普通DMEM培养基培养,小气道生长液组和Wnt3a组均使用小气道生长液培养,且Wnt3a组加入Wnt信号通路激动剂Wnt3a培养。诱导10 d后分别通过q RT-PCR和免疫荧光检测Ⅱ型肺泡上皮标志物肺表面活性蛋白B,C,D的表达,并于诱导5 d和10 d时通过Western blot检测磷酸化β-catenin和GSK-3β。结果与结论:大鼠脂肪组织中可成功分离出纯度较高的脂肪间充质干细胞,可表达CD44和CD29,不表达CD11b和CD45;经小气道生长液诱导后,脂肪间充质干细胞中肺表面活性蛋白B,C,D蛋白和mR NA表达均上调(P0.01),表明其可被诱导为Ⅱ型上皮细胞;加入Wnt3a后,经诱导的脂肪间充质干细胞中肺表面活性蛋白B,C,D蛋白和mR NA表达均高于小气道生长液组(P0.01),且在诱导过程中磷酸化β-catenin表达随时间逐渐上调而GSK-3β表达逐渐下调(P0.01)。结果证实,Wnt信号通路在脂肪间充质干细胞诱导分化为Ⅱ肺泡上皮细胞过程中激活并促进干细胞的定向分化。
【作者单位】： 吉林大学第一医院二部急诊科;吉林大学第一医院呼吸科;吉林大学中日联谊医院内镜中心;
【关键词】： 干细胞 组织工程 间充质干细胞 肺泡 脂肪干细胞 脂肪间充质干细胞 Ⅱ型肺泡上皮细胞 分化 Wnta β-catenin 大鼠 脂肪 流式细胞术 GSK-β 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金(81072368) 国家级、省部级基金支持项目:吉林省卫生厅(2012Z053)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction脂肪间充质干细胞向Ⅱ型肺泡上皮细胞分化实验相关试剂及仪器:Ⅱ型肺泡上皮细胞约占所有肺泡上皮细胞的60%,其试剂及仪器来源主要功能是分泌肺泡表面活性物质以减轻表面张力防止肺Ⅳ型胶原酶/胰蛋白酶/胎牛血清、Gibco,Grand Island,NY,USA泡塌陷[1-2]。另外

【共引文献】

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本文编号：735451